Toxicologie in vitro | OCDE 492B

OCDE 492B | Méthode de test sur l’épithélium cornéen humain reconstitué (RhCE) pour l’identification des dangers oculaires

Le test OCDE 492B est une méthode in vitro reconnue internationalement pour évaluer le potentiel des substances chimiques et des mélanges à provoquer une irritation oculaire ou des lésions oculaires graves. Il est largement utilisé dans le cadre des évaluations réglementaires de sécurité et permet d’identifier les substances nécessitant une classification selon le Système Général Harmonisé des Nations Unies (GHS) pour les dangers oculaires :

• Catégorie 1 (lésions oculaires graves) ; H318
• Catégorie 2 (irritation oculaire) ; H319
• Pas de catégorie (aucune classification requise)

Le test Human Corneal Epithelium (HCE) Time-to-Toxicity (TTT), décrit dans l’OCDE 492B, est la dernière méthode ajoutée aux NAMs (New Approach Methodologies / Méthodes alternatives sans animaux) pour le test des dangers oculaires. Il représente une amélioration par rapport aux TGs 437 et 492 de l’OCDE, qui permettaient uniquement d’identifier les substances « ne nécessitant pas de classification » (Pas de catégorie) mais ne pouvaient pas distinguer les substances de catégorie 2 des substances de catégorie 1. De plus, le test HCE-TTT remplace entièrement les méthodes d’essais sur animaux, telles que le test de Draize.

Principe du test

Le modèle tridimensionnel d’épithélium cornéen humain reconstitué (RhCE) de SkinEthic™ reproduit fidèlement les propriétés histologiques et biochimiques de l’épithélium cornéen humain. La viabilité cellulaire, qui reflète l’état de santé du tissu, est quantifiée par la réduction enzymatique du sel de tétrazolium (MTT) en produit formazan. Une viabilité réduite indique un risque potentiel pour l’œil. Le test utilise plusieurs durées d’exposition pour améliorer la précision et la prédictibilité des catégories d’irritation oculaire (approche Time-to-Toxicity).

Portée du test

Le test consiste à mesurer la réduction du MTT sur le modèle tissulaire SkinEthic™ à différents points temporels après incubation avec l’échantillon testé, un témoin négatif et un témoin positif.

Variante du test

Pour les échantillons fortement colorés pour lesquels une évaluation photométrique n’est pas possible en raison d’interférences, nous proposons une approche analytique utilisant la chromatographie liquide haute performance (HPLC) pour quantifier le produit formazan formé.

Pour plus d’informations, n’hésitez pas à nous contacter.