Toxicologie in vitro | OCDE 492B

OCDE 492B | Méthode de test sur l’épithélium cornéen humain reconstitué (RhCE) pour l’identification des dangers oculaires

L’essai OCDE 492B est une méthode in vitro reconnue au niveau international pour évaluer le potentiel des substances chimiques (substances et mélanges) à provoquer une irritation oculaire ou des lésions oculaires graves. Il est largement utilisé dans le cadre des évaluations réglementaires de sécurité et permet, à lui seul, d’identifier les substances nécessitant une classification selon le Système général harmonisé des Nations Unies (GHS) pour les dangers oculaires :

• Catégorie 1 (classification « lésions oculaires graves ») ; H318
• Catégorie 2 (classification « irritation oculaire ») ; H319
• Pas de catégorie (aucune classification requise)

Le test SkinEthic™ Human Corneal Epithelium (HCE) Time-to-Toxicity (TTT), tel que décrit dans la ligne directrice OCDE 492B, constitue le dernier ajout aux NAMs (New Approach Methodologies / méthodes alternatives non animales) parmi les lignes directrices de l’OCDE relatives aux essais de danger oculaire. Il représente une amélioration par rapport aux lignes directrices OCDE 437 et 492, qui permettaient conjointement d’identifier les substances « ne nécessitant pas de classification » (No Category) ou les substances présentant un potentiel de lésions oculaires graves, sans toutefois pouvoir distinguer les substances de catégorie 2 de celles de catégorie 1. De plus, le test HCE-TTT remplace entièrement les méthodes d’essais sur animaux, telles que le test de Draize.

Principe de l’essai

Le modèle tridimensionnel d’épithélium cornéen humain reconstruit (RhCE) SkinEthic™ reproduit étroitement les propriétés histologiques et biochimiques de l’épithélium cornéen humain. La viabilité cellulaire, corrélée à l’état de santé du tissu, est quantifiée par la réduction enzymatique du sel de tétrazolium (MTT) en un colorant formazan. Une diminution de la viabilité / une cytotoxicité indique un danger oculaire potentiel.
L’essai utilise plusieurs temps d’exposition (2 pour les solides, 3 pour les liquides) afin d’améliorer la précision et la capacité prédictive de la classification de l’irritation oculaire (approche Time-To-Toxicity).

Domaine d'application de l’essai

L’essai consiste à mesurer la réduction du MTT sur le modèle tissulaire SkinEthic™ après différents temps d’exposition à l’élément d’essai, en comparaison avec des tissus traités avec un contrôle négatif et un contrôle positif, afin d’évaluer le potentiel de danger oculaire d’un produit chimique en fonction de sa capacité à induire une cytotoxicité.

Variante de l’essai

Pour les éléments d’essai fortement colorés absorbant la lumière dans la même gamme de longueurs d’onde que le colorant formazan, lorsque l’évaluation photométrique n’est pas possible en raison d’interférences, nous proposons une approche analytique utilisant la chromatographie liquide haute performance (HPLC) afin de quantifier de manière fiable la production de formazan.

Pour plus d’informations, n’hésitez pas à nous contacter.